Синтез олигонуклеотидов (праймеров).


Информация о синтетических олигонуклеотидах (праймерах) ООО "АТГ Сервис Ген":


Срок исполнения заказа 2-5 дней для Санкт-Петербурга и Ленинградской области.

Самая низкая цена за 1 шаг.

Крупным и постоянным заказчикам - скидки 10 - 30%.

Доставка по Санкт-Петербургу бесплатная.

Для удобства растворения олигонуклеотидов - видимый осадок.

Даже для 50-членных олигонуклеотидов мы используем очистку в ПААГ.


Цена на Синтез олигонуклеотидов:


Количество, ОЕ      Стоимость за шаг, руб.     Очистка    
1-3 17 ПААГ
3-5 24 ПААГ
>5 договорная ВЭЖХ


Полезная информация о синтезе олигонуклеотидов.


Автоматический амидофосфитный синтез олигонуклеотидов начинается с 3'- концевого олигонуклеотида пришитого к твердой фазе и продолжается сериями циклов до момента присоединения концевого 5'- нуклеотида. Эффективность каждого шага присоединения составляет 99%, то есть эффективность (образование олигонуклеотида заданного размера) синтеза олигонуклеотида размером 25 п.о. составляет (0.99)24=0.786, или 78,6%. Цифра 24 появляется от того, что первый нуклеотид уже присоединен к матриксу, т.е. происходит всего 24 присоединения. Последующая очистка синтезированного олигонуклеотида зависит от особенностей его дальнейшего применения.

Наиболее качественная очистка требуется модифицированным олигонуклеотидам. Существуют два основных метода очистки олигонуклеотидов: ПААГ и ВЭЖХ. Выбор метода очистки, в основном, диктуется самим олигонуклеотидом. Если нуклеотид не модифицирован, а основной задачей очистки является удаление блокированных и не полноразмерных продуктов, то ПААГ остается наиболее эффективным методом очистки. Однако данная очистка приводит к неизбежной потере массы, то есть выход продукта, состоящего из 50 п.о. намного меньше, чем из 25 п.о. Наша компания, понимая, что 50-членные нуклеотиды используются, в основном, в особо точных экспериментах, чувствительных к не полноразмерным продуктам, очищает даже длинные олигонуклеотиды с использованием ПААГ. Мы специально синтезируем большее количество длинного олигонуклеотида, чтобы даже с учетом потерь на выходе было требуемое количество олигонуклеотида. Гарантированное минимальное качество очистки для ВЭЖХ - 85%, для ПААГ - 93%.

Мы рекомендуем хранить олигонуклеотиды в концентрированной форме ТЕ буфера (10мМ Трис pH 8.0, 1 мМ ЭДТА). Не рекомендуется для растворения олигонуклеотидов вода Milipore или Barnstead, из-за ее низкого значения рН (5). В основном, следует хранить наши олигонуклеотиды в лиофилизированном виде или ресуспендированными в концентрированном ТЕ (стоковый раствор), обычном ТЕ или воде для ВЭЖХ (рабочий раствор) при -20C.